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產品名稱:pCAMBIA3300載體
供應商:遠慕
產地:國產/進口
產品類別:分子 分子克隆
產品規格:40ul,0.5μg/μl
產品單位:支
儲存方式: 4℃,室溫保存
通過RNAi策略轉化小麥,以降低小麥種子中直鏈淀粉的含量。小麥中直鏈淀粉合成的關鍵酶是顆粒結合型淀粉合成酶(Granule—bound starch synthase l,GBSSI,即WAXY蛋白),通過RT—PCR方法從小麥種子中分離出Waxy基因。Southern雜交分析表明,在基因組中存在3個Waxy基因。Northern雜交分析顯示出在授粉后的小麥種子中檢測到Waxy mRNA。利用RNA沉默策略,將Waxy編碼區683bp的正向和反向片段以及150bp內含子,連接于表達載體pCAMBIA3300中玉米ubil啟動子下游。以揚麥10號授粉后15d的幼胚為外植體,利用農桿菌介導的方法進行轉化。通過PCR、RT-PCR和葉片離體褪綠實驗鑒定出4株轉基因植株。小麥胚乳I2-KI染色和直鏈淀粉含量測定表明這4株轉基因植株直鏈淀粉含量明顯下降。研究結果表明Waxy基因的RNA沉默使轉基因小麥種子直鏈淀粉的含量下降。
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