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【核酸染料選擇】遠慕教您選擇符合實驗要求的核酸染料
閱讀次數:420 發布時間:2023/3/29 9:47:06
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核酸染料是一種靈敏、穩定和相對安全的熒光核酸染色試劑,是生物實驗中不可或缺的一分子,尤其是在核酸檢測相關試驗中,所以核酸染料對于分子生物學相關業的學生來說并不陌生,該如何選擇適合自己使用的核酸染料呢?以下從幾個方面來說明:
1、安全性:如果選擇EB替代染料,那么染料的安全性就是一個非常重要的指標。安全性評估主要的檢測有Ames測試、細胞滲透性實驗、染色體畸變和正向突變分析、口服毒性分析等。在安全性方面,具有較多檢測項目和機構出具檢測報告的核酸染料,安全性可能會更高;另外在一些報道或對比數據中,我們也可根據它們可能的原料來判斷它們的安全性。

2、 穩定性:核酸染料的穩定性和在各種條件下的染色效果,會直接影響觀察到的染色結果。

3、靈敏度:幾乎所有的EB替代染料都其染料的靈敏度至少不低于EB,甚至高于EB,具體到試驗內容上,只要不是有特殊的需求,一般都能滿足。

4、遷移率:由于核酸染料終都會結合到DNA上,才能通過染料從而對DNA進行分析,這也就意味著如果采用點染法或膠染法進行核酸檢測時,根據使用的染料不同,核酸染料或多或少會對核酸的遷移率甚至帶型產生影響。

核酸染料說明書

產品介紹:

GoldView 是一種可代替溴化乙錠(EB)的新型DNA染料,其靈敏度與EB相當,使用方法與之完全相同。在紫外燈下雙鏈DNA呈現綠色熒光。通過小鼠皮下注射實驗,尚未發現GoldView有致癌作用;而溴化乙錠(EB)是一種強致癌劑,因此用GoldView代替EB不失為一種明智的選擇。

● 儲存條件:

室溫貯存一年。

● 實驗操作步驟:

100ml溶膠液在微波爐中融化,冷卻至60℃左右(不燙手)后加入10μl GoldView,輕輕搖勻后到膠,待膠完全凝固后上樣電泳,電泳完畢在紫光燈下觀察。

● 注意事項:

1. 膠厚度不要超過0.5cm,膠太厚會影響檢測的靈敏度。

2. GoldView在pH 3.6-7.0之間能更好地與核酸結合,因此電泳時好使用新鮮的電泳緩沖液。

3. 由于GoldView染色后DNA產生綠色熒光,因此不適于用一般單色膠卷拍照,可以使用凝膠成像系統保存圖象。

4. GoldView特別適合于大片段DNA的檢測(大于1kb的片段,檢測靈敏度與EB相當);當DNA片段小于1kb時,檢測靈敏度低于EB,特別是低于500bp的片段,GoldView可能亮度很弱或檢測不到。

5. 雖然尚未發現GoldView有致癌作用,但由于GoldView溶液酸性較強,因此對皮膚、眼睛會有一定的刺激,操作時應戴手套。
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