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哺乳動物穩定細胞株篩選常見問題
閱讀次數:573 發布時間:2021/5/10 11:01:52
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哺乳動物穩定細胞株篩選常見問題

1、為什么要構建穩定細胞株
答:對于少量、臨時的實驗,瞬時轉染是完全符合需求的,但是如果試驗中需要長期大量的使用某種細胞,我們就需要構建穩定細胞株,構建穩定細胞株的好處在于
1、可以減少不同批次實驗中轉染效率差異帶來的實驗結果差異,提高實驗的可重復性。
2、構建好細胞系后不必再進行瞬時轉染實驗以及反復制備質粒,減少工作量。
3、不再使用價格高昂的轉染試劑,節約實驗成本。

2、所有的細胞株都可以構建穩定細胞系嗎?
答:不是所有的細胞株都能構建成為穩定細胞系的。構建穩定細胞系需要滿足2個條件:
1、細胞能穩定傳代;
2、細胞的轉染效率滿足要求。遠慕生物主要是為科研及工業用戶構建過表達細胞株,采用的主要是CHO細胞和293細胞。

3、構建好的穩定細胞系如何培養和保存?
答:我們提供的單克隆和多克隆細胞系培養和保存均與原來的細胞株無異,無需抗生素維持。

4、單克隆和多克隆細胞株的區別是什么?
答:單克隆細胞是轉染目的基因后經過克隆篩選得到的,由個細胞擴增形成的細胞株,目的基因整合的位置和拷貝數都是致的,可以長期維持表達量不變。多克隆細胞是轉染目的基因后直接經抗藥基因篩選得到的。是多種陽性細胞克隆的混合。在長期的培養過程中產量由可能會發生變化。
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