現在醫學檢驗中抗凝劑的應用越來越多,如何正確的應用抗凝劑,程度的發揮抗凝劑的作用,同時盡量減少其不利影響應該得到大家的重視。現在就對抗凝劑的種類與應用時的注意事項作淺要的分析。

應用物理或化學方法,除掉或抑制血液中的某些凝血因子,阻止血液凝固,稱為抗凝。能夠阻止血液凝固的
化學試劑或物質,稱為抗凝劑或抗凝物質。對抗凝劑的一般要求是用量少、溶解度大、不影響測定。常用抗凝劑的種類與應用。
1 乙二胺四乙酸鹽
EDTA是臨檢工作中*常用和*重要的抗凝劑和試劑,其機制是通過與水相中的鈣離子形成穩定的螯合物而阻止血液凝固。EDTA的鹽類有鉀、鈉、鋰鹽、均溶于水,鉀鹽較鈉鹽的溶解度大,EDTA鹽對紅、白
細胞形態影響很小,根據血液學標準公委員會(International committee standard of hematology,ICSH)1993年文件建議,血細胞計數用EDTA二鉀作抗凝劑,EDTA-NA與EDTA-K2對血細胞計數影響均較小,但二鈉溶解度明顯低于二鉀,有時影響抗凝效果,其他抗凝劑不適合于血細胞計數。
EDTA能影響某些酶的活性和抑制紅斑狼瘡因子,故不適于制作組化染色和檢查紅斑狼瘡細胞的血涂片。EDTA還會影響血小板聚集和白細胞吞噬功能,也不適于做止血學檢驗和血小板功能檢驗。用EDTA抗凝血制備的涂片對粒細胞形態有影響,其影響程度與抗凝血放置時間和抗凝劑濃度有關。用大于1.5g/L血液濃度制備的血涂片,粒細胞可完全變性,對淋巴細胞和單核細胞也有影響,尤其是血小板,可出現腫脹、破裂而產生碎片,影響其計數,造成結果偏高。隨著臨床醫學的發展,近年來糖化血紅
蛋白檢測項目的開展,也使用了EDTA-K2作為抗凝劑,從而減少了對結果的影響。
雙草酸鹽抗凝劑常用有草酸鈉、草酸鉀、草酸銨,溶解后解離的草酸根離子能與樣本中鈣離子形成草酸鈣沉淀,使Ca2+失去凝血作用,阻止血液凝固。但不適于凝血檢查。而且,草酸鹽濃度過高還會導致溶血、改變血液pH,干擾血漿鉀、鈉、氯和某些酶活性的測定。雙草酸鹽抗凝劑:適用于血細胞比積、血細胞計數、網織紅細胞計數等檢查,不適于血小板計數、白細胞分類計數。
草酸鉀 常用于供檢驗用血液樣品的抗凝。供鉀、鈣含量測定的血樣不能用草酸鉀抗凝。
2 草酸鉀-氟化鈉
草酸鉀可與血中鈣離子生成草酸鈣沉淀,從而阻止血液凝固。草酸鉀溶解度大,抗凝作用強。氟離子能結合鈣而抗凝,但抗凝效果較弱。氟離子可抑制糖酵解中的烯醇化酶,防止糖酵解,若未加氟化鈉,血標本中葡萄糖檢驗地 帶網含量將以每小時6%的速度下降。而在氟化鈉的存在下,血糖濃度在25℃可穩定24小時,4℃可穩定48小時。因此,草酸鉀-氟化鈉是血糖測定標本常使用的抗凝劑。
3 肝素
肝素是血液化學成分測定中的抗凝劑。肝素廣泛在于肺、肝、脾等幾乎所有組織和血管周圍肥大細胞和暑堿性粒細胞的顆粒中。它是一種含硫酸基團的粘多糖。其抗凝機制是與抗凝酶Ⅱ一起,在低濃度能抑制因子Ⅸa、Ⅷ和PF3之間的作用,并能加強抗凝血酶Ⅲ滅活絲氨酸蛋白酶,從而阻止凝血酶形成;還有抑制凝血酶的自我催化及抑制因子X,阻止血小板聚集的作用。盡管肝素可以保持紅細胞的自然形態,但由于其常可引起白細胞聚集,使血涂片在羅氏染色時產生藍色背景,因此肝素抗凝血不適全血液學一般檢查。肝素是紅細胞透滲脆性試驗理想的抗凝劑。
因為肝素鈉能增加血漿鈉的含量,而肝素銨能增加尿素氨的含量。某些生化成分在血清和肝素抗凝的血漿中有明顯的區別。在凝血過程中由于紅細胞的溶解破壞使血清鉀的含量比血漿為高,由于血漿中含有纖維蛋白原,其含量比血清高。因此,測定鉀離子時,注意血清與血漿之間的差異。 血漿中的總蛋白質量是包含了纖維蛋白原在內的所有蛋白質,而血清中是不含有纖維蛋白原的總蛋白質含量,理論上應該低于血漿中的總蛋白含量。因此在進行血液總蛋白質含量測定時,以血清為標本,對一些急診標本,或是一些因其他原因急需測定的患者,需要用血漿做標本測定總蛋白時,在測出總蛋白后,應扣除纖維蛋白原的含量(一般扣除3%~5%),這樣才能與以血清為標本測得的總蛋白含量一致,真實反映患者體內實際總蛋白質之含量。
4 枸椽酸鈉
枸椽酸鈉 枸椽酸鹽其抗凝機制是枸椽酸鹽與可與血中鈣離子形成可溶性螯合物,從而阻止血液凝固。枸椽鈉對凝血V因子有較好的保護作用,使其活性減低緩,故常用于凝血象的檢查,也用于紅細胞沉降率的測定。因毒性小,是輸積壓保養中的成分。
枸櫞酸鹽其鹽類主要是鈉鹽。對于用于監測口服華法令等抗凝劑治療的患者,測定PT、APTT所用的枸緣酸鈉濃度(3.2%或3.8%)不應隨意改變,因為可能影響到標準化比值(INR)。一般用濃度0.129mol/L的枸緣酸鈉比用0.109mol/L濃度時INP值要高些,另外對不同來源的凝血活酶試劑,對同一正常人或患者血漿的凝固時間可以相差很大。因此每個實驗室所使用的凝血活酶試劑的來源應盡可能恒定,配制操作方法應規范化,否則會使凝固時間延長或縮短,或使正常值無規律性。有條件的實驗室可采用緩沖抗凝劑,這種試劑對標本經冷凍保存后再進行分析更為適宜。緩沖劑的作用是維持血漿恒定pH值,防止易變因子失活。
綜上所述,抗凝劑的種類及對檢驗結果的影響已非常清楚,遠慕提醒大家在今后的工作中多加注意。