流動相中緩沖鹽的正確使用方法
1、使用的處理
在使用緩沖鹽作流動相之需要用不含緩沖鹽的流動相沖洗色譜柱，直至基線平穩。原則上，用于沖洗的流動相與分析時所用的流動相含水的比例相同(或含水更多)，不同的只是用于沖洗用的流動相中不含緩沖鹽。理由：緩沖鹽通常易溶于水，難溶于有機溶劑。用含緩沖鹽的(特別是做流動相的水為飽和的緩沖鹽溶液時)流動相進行分析時，如果分析色譜柱中用于保存色譜柱的流動相中含水的比例相對較小，不先沖洗掉，接下來做樣品的時候所用的流動相中如果有機溶劑含量大，而其比例中所含的水又不足以溶解該緩沖鹽時，緩沖鹽將會在色譜柱柱體上析出，沉積下來，這將可能導致上述對色譜柱的損害。
2、使用后的處理
用與分析時含水比例相同的流動相(與分析用流動相唯1的區別是，用于沖洗的流動相不含緩沖鹽)進行沖洗約30min，直至基線平穩。如果該色譜柱在接下來很長的一段時間內不使用，要長/期保存，則需再加上一步，即用純的有機溶劑沖洗一遍，直至基線平穩。
使用緩沖液要注意幾點1、避免使用鹽酸鹽，鹽酸鹽對鋼質有腐蝕作用。
2、緩沖液/好要現配現用，往往緩沖液是良好的菌類培養液，隔天或放置長時間實驗時會有很多怪現象發生。
3、實驗后不可用有機溶劑直接過度，有機溶劑會處使鹽類析出，造成液路或色譜柱堵塞，可用95：5的水甲醇沖洗。
4、使用緩沖液要及時掌握ph范圍，做到胸中有數。
5、清洗液路和柱子時，有溫控可加熱到30攝氏度易于沖洗。
6、長時間用緩沖溶液要注意觀察接頭處有無析出，若有白色鹽類析出，可考慮一定周期用10%硝酸沖洗一下液路(拆下柱子，走30ml,再用5倍水沖洗)可以避免液路的堵塞。
7、選擇緩沖液要用可靠的試劑，避免不純的鹽類造成不必要的麻煩。
如果流動相中有機溶劑的比例很高是不能用來沖洗緩沖鹽的，是洗不出來的。通常C18柱先用5%~10%的甲醇沖洗，是可以把緩沖鹽沖洗出來的，然后用純的有機溶劑來保護柱子。/好的方法是使用與流動相相同濃度不含鹽的流動相進行清洗。但就是速度慢一些。用水是為了快速替換，一般在15分鐘以內/好，且用0.8的流速較好. 如果用純水沖，容易造成鍵合的碳鏈的流失/好用5%~10%甲醇水溶液沖。可以用純水代替流動相中的緩沖液，有機相不變。這樣沖洗柱子比較穩妥。
原創作者：上海遠慕生物科技有限公司
客服一
