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人體細胞在凋亡的過程中，DNA斷裂并分泌至細胞外。健康細胞，胎兒細胞，腫瘤細胞以及移植的細胞都可以通過這種方式釋放游離DNA至血液中。同時cfDNA(cell-free DNA) 是腫瘤和產前診斷研究中，被證實有用的標記物。

隨著液體活檢技術的不斷發展，對這些的游離核酸檢測有望成為替代組織活檢的重要方法。大家比較熟悉的游離核酸檢測手段有定量PCR、NGS等傳統方法和正在迅猛發展的數字PCR。

但cfDNA在體液中的含量非常低，通常血清中含量低于10ng/mL。 如何從含量如此低的樣本中，抽提出適合檢測手段的游離核酸？

液體活檢技術的興起，使得游離核酸樣本的數量大增，高通量形式的核酸抽提成為了工作者們的追求，如何低成本解決通量問題？

那就從下方的描述中找到適合您的游離核酸抽提方式吧。

市面上的游離核酸抽提試劑盒大多是基于柱膜法的原理、還有一部分是基于磁珠法的抽提原理。有單管離心、多管真空抽濾、96孔板真空抽濾、磁珠法高通量等形式。*常用的為多管真空抽濾的方式。

多管真空抽濾

采用真空抽濾的方法，在真空抽濾裝置上，可同時提取24個1-10mL血清、血漿、尿液等樣本, 結合&洗滌過程無需使用離心機。大多客戶用此方法來抽提2-4mL血漿，得到的游離核酸用于后續的PCR、NGS、甲基化研究。整個抽提過程需要約45min-3h不等，具體的操作時間要根據使用的品牌來定。

應用數據：

從5mL EDTA血漿中純化cfDNA
NucleoSnap® DNA Plasma kit 和競爭對手(Competitor Q)比較結果

從Cell-Free DNA BCT® (Streck)提取cfDNA
 3個不同Cell-free DNA BCT® 保存的樣品，分別使用 NucleoSnap® DNA Plasma (MN) 和a vacuum-processed kit of a competitor (Q)提取cfDNA.使用Bioanalyzer™ 2100 with a High Sensitivity DNA Kit (Agilent)檢測，分離到的游離核酸在170bp附近有典型的峰（箭頭標記）

10mL尿液中分離cfDNA電泳圖
抽提的cfDNA使用 Bioanalyzer™ 2100 with a High Sensitivity DNA Kit (Agilent)分析，在170bp附近有典型的片段分布

原創作者：上海遠慕生物科技有限公司