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酵母菌簡介：

酵母菌是基因克隆實驗中常用的真核生物細胞，也是食品工藝中常用的微生物，如釀酒酵母。

酵母菌細胞寬度（直徑）約2~6μm，長度5~30μm，有的則更長，個體形態(tài)有球狀、卵圓、橢圓、柱狀和香腸狀等。由于其尺寸較小，形狀不規(guī)則，因此采用明場法無法進行準確的計數(shù)，更不易進行酵母活性的檢測！

采用雙熒光通道設(shè)計的細胞計數(shù)儀，可更加準確地進行細胞計數(shù)和細胞活性分析。

接下來我們看一下它是如何進行酵母計數(shù)和活性檢測的吧？


步驟一：FDA/PI染色

取1?l FDA試劑、1?l PI試劑加入到18?l酵母菌液中，避光孵育10min。

FDA/PI試劑染色原理介紹：FDA是一種非熒光性疏水性熒光素衍生物，它可以穿透細胞膜進入細胞，通過細胞內(nèi)酯酶催化水解二乙酸酯基團產(chǎn)生具有高熒光強度的熒光素。因此活細胞具有綠色熒光。無活性的死細胞被PI著色，發(fā)出紅色熒光。因此，可以很好的辨別死細胞與活細胞，準確的進行細胞活性的檢測。

步驟二：上樣

用移液槍吸取10?l 樣品加入到細胞計數(shù)板中。

將細胞計數(shù)板插入到LUNA FL中。

步驟三：檢測

直接點擊內(nèi)置的酵母檢測App

在明場下進行調(diào)節(jié)焦距，然后點擊Count即開始細胞檢測，30秒內(nèi)即可完成。

步驟四：結(jié)果查看、分析、導(dǎo)出

結(jié)果查看：

我們可以得到Total /Live /Dead細胞數(shù)量、細胞活性、細胞平均尺寸等數(shù)據(jù)。

結(jié)果分析：

我們可以設(shè)置細胞分析的尺寸范圍以及聚團情況等。

結(jié)果導(dǎo)出：

點擊Save/Print即可將結(jié)果導(dǎo)出，您可以選擇保存3個通道的原始圖片、加了Tag的圖片、包含了該次檢測所有信息的PDF文件。

原創(chuàng)作者：上海遠慕生物科技有限公司