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技術文獻

血漿游離血紅蛋白測定實驗說明
閱讀次數:525 發布時間:2020/5/29 11:23:23
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實驗原理

  血紅蛋白具有類過氧化物酶活性,可催化H2O2釋放新生態氧,使鄰甲聯苯胺氧化發生顏色變化,由無色*終變為藍紫色。根據顯色深淺與標準進行比較,可測出其含量。


 

實驗方法
  材料:
 
  1.2g/L鄰甲聯苯胺溶液
  2.1%H2O2
  3.10%醋酸溶液
 
  4.分光光度計
 
  方法:
  1.抽取靜脈血2-3ml,枸櫞酸鈉抗凝,離心分離血漿。

  2.按下表進行操作,用分光光度計,波長為530nm,以空白管調零,測定測定管的吸光度。


 

試劑 (ml)
測定管
空白管
2 g/L鄰甲聯苯胺溶液
0.5
0.5
患者血漿
0.02
/
1% H2O2
0.5
0.5
混勻后室溫放置10min
10%醋酸溶液
5.0
5.0

室溫放置10min


 

  3.計算公式

  血漿游離Hb(mg/L)=測定管吸光度/標準管吸光度×100
實驗結果計算

  參考范圍:0-40mg/L


 

注意事項
  1.一切容器避免血紅蛋白污染;
 
  2.采血要順利,器皿要干燥,檢測血漿要新鮮,及時分離,防止人為溶血;
  3.鄰聯苯胺溶液具致癌性,檢測時要小心,廢液要妥善處理,以免污染;
  4.雙氧水要新鮮配置,濃度要準確。
 


 

原創作者:上海遠慕生物科技有限公司

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