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技術文獻

表達β-半乳糖苷酶噬菌體的噬菌斑分析
閱讀次數:855 發布時間:2018/9/25 9:19:33
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材料:

LB或NZCYM頂層瓊脂或瓊脂糖,含有X-gal。對于3ml頂層瓊脂,加40µl 2%X-gal。X-gal要在臨用前才加入已冷卻的頂層瓊脂(47℃)中。
 

大腸桿菌鋪平板細菌。只有不是β-半乳糖苷酶的過量表達株,可采用任何支持特異性λ噬菌體裂解生長的大腸桿菌。細菌染色體上單拷貝lacZ基因的存在不影響噬菌斑的檢測。

 

方法:
1.  將λ噬菌體原種于SM+明膠液稀釋。
2.  用10µl適當稀釋的λ噬菌體感染0.1ml鋪平板細菌。感染培養物37℃溫育20min。
3.  用3ml含X-gal的已熔頂層瓊脂(47℃)至個試管,通過輕拍或輕微渦旋振蕩混勻,隨后倒入至瓊脂平板上。
4.  用剩下的噬菌體原種的稀釋液重復步驟3。
5.  當頂層瓊脂凝固后,將平板于37℃倒置培養15-18h。
6.  將平板哦成那個37℃培養箱中取出,再于室溫下放置2h,然后記錄噬菌斑的顏色。



生化試劑的種類與等級說明:
(1)免疫試劑包括抗體及抗血清、正常血清及補體、抗原、免疫組織化學研究用試劑、細胞培養用試劑、細胞分離試劑、凝膠內擴散法及電泳試劑等。
(2)基因工程用試劑包括基因表達與基因重組、人工合成蛋白、激素、核酸合成試劑、核酸制劑、內切酶等。
(3)誘變劑和致癌物質主要供測定工作場所與生活環境中的毒物質的致癌性與化學毒物的致突變性。
(4)臨床診斷試劑主要供醫療系統中的臨床病理診斷、生化診斷、液晶診斷、同位素診斷與一般化學診斷等診斷檢查中所用的一大類化學試劑
(5)工業用化學品包括試制開發的工業用化學品,有四千種以上,還在不斷增加。

 


管理竅門:
一般按用途可以分為通用試劑、高純試劑、分析試劑、儀器分析試劑、臨床診斷試劑、生化試劑、無機離子顯色劑試劑等。有四種常用規格:
1.優級純或一級品(GR 精密分析和科學研究工作);
2.分析純或二級品(AR 重要分析和一般研究工作);
3.化學純或三級品(CP 工礦及學校一般化學實驗);
4.實驗試劑(L.P.)。
大多數的試劑具有一定的毒性及危險性。對科研試劑的加強管理,不僅是保證分析結果質量的需要,也是確保人民生命財產安全的需要。試劑應根據毒性、易燃性、腐蝕性和潮解性等不同的特點,以不同的方式妥善管理。
保存注意事項:低溫、避光、干燥陰涼處封閉貯存,嚴禁與有毒、有害物品混放、混運。本品為非危險品,可按一般化學品運輸,輕搬動輕放,防止日曬、雨淋。
我們提供的試劑產品品質優良,都是通過嚴格的檢測體系認證。
 

原創作者:上海遠慕生物科技有限公司

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