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技術文獻

上海遠慕為您解惑:蘇木素-伊紅染色的基本原理
閱讀次數:1165 發布時間:2017/7/12 9:19:09
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  接下來,上海遠慕為您解惑,為您說明蘇木素-伊紅染色的基本原理。

    先說說蘇木素吧,蘇木素是*早用于生物學上的天然染色劑,百余年來,一直是生物學實驗室*常用的組織學中細胞核的染料,它是從蘇木樹的樹心中提煉出來的,為淺褐色結晶或淡黃褐色的粉末狀物。易溶于乙醇、甘油,也可溶于熱水。蘇木素本身沒有染色能力,它經過氧化后,能產生具有染色能力的蘇木紅,蘇木紅又稱為氧化蘇木素或蘇木因。

    蘇木素變成蘇木紅的過程叫作“成熟”。成熟的方法一般有兩種:一種是把配制好的蘇木素液在開口瓶中放置兩個月以上,讓其在日光和空氣中的氧的作用下使之氧化。故一般地盛蘇木素的瓶子放在向陽處,時間愈長,染色的效果愈好。常配制一大瓶,備長期使用。另一種方法是在蘇木素液中加入氧化劑,如磺酸鈉,過錳酸鉀,,雙氧水等。用這種方法成熟與用種方法者不同的是,它放置時間愈長,染色的效果愈低。這是因為蘇木紅被繼續氧化可生成無色的化合物,故一次不宜配制過多,還應放置40C冰箱內避光保存以延長使用時間。它的優點是配制后即可使用。

    成熟的蘇木素對組織并無親和力,須加入含金屬離子的媒染劑,才能達到染色的目的。一般用于明礬蘇木素的媒染劑為鉀明礬或氨明礬。主要是利用明礬中的鋁離子和蘇木紅結合形成的鋁沉淀色素為紫藍色,對染色質有很大的親和力,水和酒精都不能使其褪色。用于鐵蘇木素的媒染劑是三價鐵離子,蘇木紅的鐵沉淀色素為黑藍色,不溶于水,因此,故不能配制大量含媒染劑的混合液,一般用時現配,或在染色過程中,先用鐵明礬媒染,然后再染蘇木素,如磷鎢酸蘇木素染色即是。

    常規蘇木素染色的對比染色是用伊紅,也有采用焰紅,因為焰紅比伊紅色澤更鮮明,此外還有采用橘黃G,比布里希猩紅,波爾多紅等作為對比染色。

    蘇木素-伊紅染色,在組織病理學中,是一種日常使用*為廣泛的常規染色方法。一張優質的染色切片,可以清晰地觀察到各種不同的組織結構以此作為病理診斷的確切依據。再根據此染色切片所見,分別進行不同的特殊染色。

    
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