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技術文獻

豬主要組織相容性復合體Ⅱ試劑盒使用說明書
閱讀次數：634 發布時間：2015/11/30 9:44:40

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豬主要組織相容性復合體Ⅱ 試劑盒使用說明書

本試劑盒僅供研究使用。

檢測范圍： 48T

25 ng/L -800 ng/L

使用目的：

本試劑盒用于測定豬血清、血漿及相關液體樣本主要組織相容性復合體Ⅱ類（MHC-Ⅱ）含量。

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中豬主要組織相容性復合體Ⅱ類（MHC-Ⅱ）水平。用純化的豬主要組織相容性復合體Ⅱ類（MHC-Ⅱ）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入主要組織相容性復合體Ⅱ類（MHC-Ⅱ），再與HRP標記的主要組織相容性復合體Ⅱ類（MHC-Ⅱ）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的主要組織相容性復合體Ⅱ類（MHC-Ⅱ）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中豬主要組織相容性復合體Ⅱ類（MHC-Ⅱ）濃度。

豬主要組織相容性復合體Ⅱ試劑盒組成

1	20倍濃縮洗滌液	20ml×1瓶	7	終止液	3ml×1瓶
2	酶標試劑	3ml×1瓶	8	標準品（1600ng/L）	0.5ml×1瓶
3	酶標包被板	12孔×4條	9	標準品稀釋液	1.5ml×1瓶
4	樣品稀釋液	3ml×1瓶	10	說明書	1份
5	顯色劑A液	3ml×1瓶	11	封板膜	2張
6	顯色劑B液	3ml×1/瓶	12	密封袋	1個

標本要求

1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟

1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

800 ng/L	5號標準品	150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
400 ng/L	4號標準品	150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
200 ng/L l	3號標準品	150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
100 ng/L	2號標準品	150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
50 ng/L	1號標準品	150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液