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技術文獻

微量分光光度計和普通分光光度計的區別
閱讀次數:338 發布時間:2022/12/6 9:58:16
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傳統分光光度計:
1、樣品體積要求大,絕大部分要50μL以上
2、需使用比色皿
3、每次換樣品時,比色杯需要清洗,工作繁重
4、光程一般為10mm,樣品需要稀釋,測量濃度范圍小
5、燈源一般由氘燈(紫外)和鎢燈(可見)組成,壽命短
6、需要預熱半個小時以上
7、顯示吸光度值,不顯示濃度值
8、儀器體積大,質量重

微量分光光度計:
1:所需樣品體積小,僅需1~2μL
2:不需要比色皿,用移液槍直接將樣品滴加到檢測平臺上,測量時樣品會自動形成液柱
3:只需用干凈的吸水紙將樣品從檢測平臺上擦拭干凈即可
4:具有1mm和0.2mm兩個光程(由電磁閥調節),樣品無需稀釋,測量范圍可達到常規分光光度計的50倍
5:氙氣閃光燈為燈源,壽命長,性能穩定
6:不需要預熱,可隨時檢測
7:顯示吸光度值的同時,程序直接給出濃度值(核酸、蛋白和熒光染料)
8:體積小(21cm×17cm×11cm ),質量輕(1.35kg)

常見分光光度計種類及區別
分光光度計是一種分析測量光譜的儀器,因為應用需求的不同,分光光度計有著不同的種類。分光光度計按照波長及應用域的不同可以分為:

(1)可見光分光光度計
(2)紫外分光光度計
(3)紅外分光光度計
(4)熒光分光光度計
(5)原子吸收分光光度計。

現生命科學域比較流行的超微量分光光度計是屬于紫外分光光度計的一種。

(1)可見分光光度計

用來測量待測物質對可見光(400~760nm)的吸光度并進行定量分析的儀器,稱為可見分光光度計。可在600nm測定細菌細胞密度。

(2)紫外可見分光光度計

紫外可見分光光度計用來測量待測物質對可見光或紫外光(200~760nm)的吸光度并進行定量分析的儀器。可以測定核酸和蛋白的濃度,也可以測定細菌細胞密度。紫外分光光度計又可分為單光束,假雙光束,雙光束。它們的用途又有區別。

a) 單光束:適于在給定波長處測量吸光度或透光度,一般不能作全波段光譜掃描,要求光源和檢測器具有很高的穩定性。
b) 雙光束:自動記錄,快速全波段掃描。可消除光源不穩定、檢測器靈敏度變化等因素的影響,特別適合于結構分析。儀器復雜,價格較高。
c) 假雙光束也就是比例雙光束,它的原理是由同一單色器發出的光被分成兩束,一束直接到達檢測器,另一束通過樣品后到達另一個檢測器。這種儀器的優點是可以監測光源變化帶來的誤差,但是并不能消除參比造成的影響。
 
(3)紅外分光光度計

一般的紅外光譜是指大于760nm的紅外光譜,這是研究有機化合物常用的光譜區域,能分析各種狀態(氣、液、固)的試樣。

紅外光譜法的特點是:快速、樣品量少(幾微克-幾毫克),特征性強(各種物質有其特定的紅外光譜圖)、能分析各種狀態(氣、液、固)的試樣以及不破壞樣品。
 
(4)熒光分光光度計

熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標記物所發出的熒光光譜的一種儀器。應用于科研、化工、醫藥、生化、環保以及臨床檢驗、食品檢驗、教學實驗等域。

通過對這些參數的測定, 不但可以做一般的定量分析, 而且還可以推斷分子在各種環境下的構象變化,從而闡明分子結構與功能之間的關系。
(5)原子吸收分光光度計
 
該法主要適用樣品中微量及痕量組分分析常規儀器。是材料分析及質量控制部門進行常量、微量金屬(半金屬)元素分析的有力工具。

以上幾種常見的分光光度計種類區別便是本文為大家介紹的內容,希望大家能夠在了解之后更好的運用分光光度計。

原創作者:上海遠慕生物科技有限公司

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