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培養基不凝固怎么辦?凝固物質又有哪些?
閱讀次數:1609 發布時間:2022/10/9 9:40:10
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你知道培養基的凝固物質有哪些嗎?跟著遠慕生物來學習一下吧!

常用的凝固物質為瓊脂,特殊情況下也可用明膠、卵白蛋白、血清等。

抑制劑和指示劑:用于選擇、鑒定及判斷結果。

1.抑制劑:必須具有選擇抑制作用。目的在于抑制非檢出菌(非目的菌)的生長,以利于檢出菌(目的菌)的生長。常用膽鹽、煌綠、亞硫酸鈉、亞硒/酸鈉及一些染料和某些抗生素等。

2.指示劑:在培養基中加入一定種類的指示劑,是為了觀察細菌是否利用和分解培養基中的糖、醇類。常用的有酚紅、中性紅、甲基紅、溴甲酚紫、溴麝香草酚藍、中國藍等酸堿指示劑。亞甲藍常用作氧化還原指示劑。

培養基不能凝固的原因

①培養基制備過程中過度加熱

②低pH值造成培養基酸解

③瓊脂使用量不正確

④瓊脂未完/全溶解

⑤培養基成分未充分混勻

培養基的使用

1.瓊脂培養基的融化

將培養基放到沸水浴中或采用其他有相同效果的方法(如高壓鍋中的蒸汽)融化。經過高壓滅菌的培養基盡量減少重新加熱的時間,避免過度加熱。培養基融化后立即移開,室溫靜置片刻(約2min),以免玻璃容器發生破裂。

融化后的培養基放入47℃~50℃恒溫水浴鍋中保溫,冷卻到47℃~50℃所需的時間取決于培養基的類型、體積和在水鍋里的分裝量。融化后內培養基應盡快使用,放置時間一般不超過4h。剩余的培養基固后不得再次融化使用。特別是靈敏性培養基,應根據相關標準,縮短融化后放置的時間。

將瓊脂培養基倒入類似檢測培養使用的獨立容器中,插入溫度計,記錄并保存瓊脂的融化溫度。

加入樣品的培養基應將溫度調節到44℃~47℃,或按照相關標準調節溫度。

2.培養基的脫氣

必要時,在使用將養基放到沸水浴或蒸汽浴中加熱15min,加熱時松開容器蓋子;加熱后蓋緊蓋子,并迅速冷卻至使用溫度。

3.添加成分的加入

對熱不穩定的添加成分應在培養基冷卻至47℃~50℃時加入,滅菌的添加成分加入應冷卻至室溫,避免冷的液體會造成瓊脂凝膠或形成片狀物。將添加成分慢加入培養基并充分混勻,盡快分裝到待用的容器中。

4.培養基的棄置

所有污染和未使用的培養基的棄置應采用安全的方式,并符合相關法律法規的規定。

原創作者:上海遠慕生物科技有限公司

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